TP 12 comportement et stress

TP 12 Mise en évidence expérimentale du stress aigu

Activité 1 : Mise en évidence de l’activation de certaines zones cérébrales

• Extrait musicaux soumis aux testeurs. La quelle inspire la joie ? la peur ?

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• “EduAnat2“
• IRM anatomique
• dossier “13142MusiqueEtEmotion”

une IRM fonctionnelle “IRMsujet13142MusiqueJoyeuseVsTerrifiante (’IRMf est déjà “seuillé”, il faut donc régler le seuil à 0.)

Activité 2 : Mise en évidence d’une sécrétion de cortisol

La technique de dosage d’immunoabsorption par enzyme liée (en anglais Enzyme-Linked Immuno Assay) ou ELISA est principalement utilisée en immunologie afin de détecter et/ou doser la présence de protéines, d’anticorps ou d’antigènes, dans un échantillon.

En cas de stress,la sécrétion de CRH (corticotropin-releasing hormone) par l’hypothalamus augmente : le CRH met à contribution l’axe hypothalamo-hypophyso-corticosurrénalien, entraînant dans un second temps la libération du cortisol. Le cortisol favorise la mobilisation du glucose et inhibe certaines fonctions (dont le système immunitaire). Le cortisol exerce en retour un rétrocontrôle négatif sur la libération de CRH par l’hypothalamus et favorise le rétablissement de conditions de fonctionnement durable (résilience) ». Une personne stressée présente un taux de cortisol plasmatique mais également salivaire supérieur à la normale. Cela explique que le dosage du cortisol salivaire soit devenu un indicateur de ce phénomène.

Madame X est  victime de stress aigu ou de stress chronique.  

On cherche à démontrer si Mme X est stressée. 

Document de référence

Dosage de cortisol par le principe du test Elisa. 

Si de la cortisol est présente dans la salive, la cortisol peut se fixer sur l’anticoprs anti-cortisol présent au fond du puits. Mais cette molécule entre en compétition avec la du cortisol lié à de la β-galactosidase. La coloration va donc dépendre du nombre de cortisol lié à de la β-galactosidase qui auront pu se fixer. 

La coloration est proportionnelle à la concentration en cortisol à doser. 

Pour aller plus loin

La tête au carré : Les effets du stress

• Interpréter des données d’imagerie médicale et/ou d’électrophysiologie sur l’activité neuronale de certaines zones cérébrales en réponse à des agents stresseurs.

Source activité 1

Source activité 2

Fiche technique pour préparateur

• avoir des barettes vides
• on coule au fond des puits 80 μL de gel d’AGAR, préparé en mélangeant 0,5 g d’agar dans 50 mL eau.
• On prépare des solutions de soude à différentes concentrations : la solution de soude C1 a une concentration de 5 mol/L. On a préparé la solution C2 en diluant 2 fois la solution C1, puis la solution C3 en diluant 2 fois la solution C2, etc.

  

•  solutions de soude et eau distillée dans becher

  On a préalablement préparé du jus de choux rouge en suivant la recette suivante :

  • couper en lamelles un quart de choux rouge
  • recouvrir d’eau puis porter à ébullition durant 30 minutes
  • filtrer à l’aide d’une passoire
  • le jus obtenu se conserve une semaine au frais dans un flacon teinté

  Noté ONGP sur cette solution de chou rouge